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多(duō)肽合成儀的運行原理

更新時間:2023-02-28      點擊次數:772
多(duō)肽固相(xiàng)合成法是多(duō)肽合成化學的一(yī)個(gè)重大的突破,其最大特點是不必純化中間産物(wù),合成過程能(néng)夠連續進行,從(cóng)而為(wèi)多(duō)肽合成的自(zì)動化奠定了基礎。
 
多(duō)肽合成儀能(néng)夠用于合成各種蛋白(bái)質與多(duō)肽,進行蛋白(bái)質結構、功能(néng)以及體外相(xiàng)互作用、免疫學等方面的研究,包括合成漢坦病毒核衣殼蛋白(bái)抗原多(duō)肽片段以及多(duō)肽類藥物(wù)的研制。
 
運行原理:
 
多(duō)肽合成儀以固相(xiàng)合成為(wèi)反應原理,在密閉的防爆玻璃反應器(qì)中使氨基酸按照(zhào)已知順序(序列,一(yī)般從(cóng)C端-羧基端 向 N端-氨基端)不斷添加、反應、合成,操作最終得到(dào)多(duō)肽載體。固相(xiàng)合成法,大大的減輕了每步産品提純的難度。為(wèi)了防止副反應的發生(shēng),參加反應的氨基酸的側鏈都是保護的。羧基端是遊離的,并且在反應之前必須活化。固相(xiàng)合成方法有兩種,即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多(duō)優勢,現在大多(duō)采用Fmoc法合成,但對于某些短肽,tBoc因其産率高(gāo)的優勢仍然被很多(duō)企業(yè)所采用。
具體合成由下(xià)列幾個(gè)循環組成:
1)去保護:Fmoc保護的柱子和單體必須用一(yī)種堿性溶劑(piperidine)去 除氨基的保護基團。
2)激活和交聯:下(xià)一(yī)個(gè)氨基酸的羧基被一(yī)種活化劑所活化。活化的單體與遊離的氨基反應交聯,形成肽鍵。在此步驟使用大量的超濃度試劑驅使反應完成。循環:這兩步反應反複循環直到(dào)合成完成。
3)洗脫和脫保護:多(duō)肽從(cóng)柱上(shàng)洗脫下(xià)來,其保護基團被一(yī)種脫保護劑(TFA) 洗脫和脫保護。
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