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多(duō)肽合成儀的工(gōng)作原理

更新時間:2023-06-29      點擊次數:565
多(duō)肽是一(yī)種與生(shēng)物(wù)體内各種細胞功能(néng)都相(xiàng)關的生(shēng)物(wù)活性物(wù)質,它的分子結構介于氨基酸和蛋白(bái)質之間,是由多(duō)種氨基酸按照(zhào)一(yī)定的排列順序通(tōng)過肽鍵結合而成的化合物(wù)。
 
多(duō)肽合成是一(yī)個(gè)以樹脂(人工(gōng)合成的固相(xiàng)介質)為(wèi)載體,在一(yī)定的反應條件(jiàn)下(xià)重複添加氨基酸,經過化學反應後合成多(duō)肽的過程,多(duō)肽合成儀即是用來合成多(duō)肽的儀器(qì)。一(yī)般情況下(xià),多(duō)肽合成儀整體由主體、傳輸設備、動力裝置以及軟件(jiàn)系統組成。
 
多(duō)肽合成儀以固相(xiàng)合成為(wèi)反應原理,在密閉的防爆玻璃反應器(qì)中使氨基酸按照(zhào)已知順序(序列,一(yī)般從(cóng)C端-羧基端 向 N端-氨基端)不斷添加、反應、合成,操作最終得到(dào)多(duō)肽載體。固相(xiàng)合成法,大大的減輕了每步産品提純的難度。為(wèi)了防止副反應的發生(shēng),參加反應的氨基酸的側鏈都是保護的。羧基端是遊離的,并且在反應之前必須活化。固相(xiàng)合成方法有兩種,即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多(duō)優勢,現在大多(duō)采用Fmoc法合成,但對于某些短肽,tBoc因其産率高(gāo)的優勢仍然被很多(duō)企業(yè)所采用。
 
具體合成由下(xià)列幾個(gè)循環組成:
1、去保護:Fmoc保護的柱子和單體必須用一(yī)種堿性溶劑(piperidine)去 除氨基的保護基團。
2、激活和交聯:下(xià)一(yī)個(gè)氨基酸的羧基被一(yī)種活化劑所活化。活化的單體與遊離的氨基反應交聯,形成肽鍵。在此步驟使用大量的超濃度試劑驅使反應完成。循環:這兩步反應反複循環直到(dào)合成完成。
3、洗脫和脫保護:多(duō)肽從(cóng)柱上(shàng)洗脫下(xià)來,其保護基團被一(yī)種脫保護劑(TFA) 洗脫和脫保護。
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